Com notificação em mais de 50 países de cinco continentes, a Peste Suína Africana (PSA) vem se alastrando, causando perdas econômicas significativas na suinocultura e uma escassez na disponibilidade da proteína animal nos países afetados, gerando grande preocupação em autoridades, organizações governamentais públicas e privadas e do setor suinícola mundial. Altamente contagiosa, a doença é causada pelo vírus da família Asfarviridae, que afeta exclusivamente animais da espécie suína, não acometendo seres humanos.

Presidente da Sociedade Europeia de Virologia Veterinária e diretor do laboratório de referência para a PSA da OIE, José Manuel Sánchez-Vizcaíno: “Candidatos a vacinas racionalmente desenhados e desenvolvidos por manipulação genética são as alternativas mais promissoras” – Foto: Jaqueline Galvão/OP Rural

Embora tenham sido realizados estudos desde 1960 e diversos ensaios clínicos estejam em andamento no mundo desde então, ainda não há vacinas comerciais disponíveis para prevenir a PSA, de modo que o controle da doença se dá basicamente pelo abate dos animais afetados.

Entre janeiro de 2020 e abril de 2022, mais de 1,1 milhão de casos em suínos foram notificados em 35 países, de acordo com dados da Organização Mundial de Saúde Animal (OIE). Diante do atual cenário, cientistas intensificaram pesquisas para o desenvolvimento de vacinas experimentais a fim de melhorar o manejo epidemiológico da doença. Em junho, o Vietnã anunciou a primeira vacina do mundo contra a PSA, com eficácia por seis meses. Criado em parceria com pesquisadores dos Estados Unidos, o imunizante deverá estar disponível inicialmente apenas no mercado vietnamita.

O tema foi amplamente debatido na sessão sobre “Peste Suína Africana: inovações para controlar” durante o Pré-Congresso do IPVS2022, evento que deu o start ao encontro mundial do setor suinícola, em junho, na cidade do Rio de Janeiro, RJ.

Estudos avançam nos Estados Unidos

De acordo com o presidente da Sociedade Europeia de Virologia Veterinária e diretor do laboratório de referência para a Peste Suína Africana da Organização Mundial para Saúde Animal (OIE), José Manuel Sánchez-Vizcaíno, que também é professor doutor pela Universidade Complutense de Madrid, na Espanha, dentre as vacinas experimentais, aquelas baseadas no uso de cepas atenuadas constituem as candidatas mais bem-sucedidas. “Embora as abordagens para o desenvolvimento de cepas atenuadas da PSA tenham considerado o uso de isolados naturalmente atenuados, bem como aqueles obtidos por adaptação para crescer em culturas celulares, os candidatos a vacinas racionalmente desenhados e desenvolvidos por manipulação genética são as alternativas mais promissoras”, evidenciou.

A atenuação de vírus virulento foi conseguida pela exclusão de genes da PSA associados à virulência em suínos por meio de manipulação genética. A partir desta abordagem, vários candidatos a vacinas recombinantes experimentais foram desenvolvidos a partir de estudos feitos com o vírus de alta virulência genótipo II encontrado nos suínos contaminados na Geórgia, em 2007, denominado PSA-G.

Diferentes tentativas para desenvolver candidatos a vacinas recombinantes vivas atenuadas induzindo proteção contra o vírus da PSA encontrado na Geórgia estão sendo realizadas no laboratório do Centro de Doenças Animais de Plum Island, nos Estados Unidos, conduzidas por Manuel Borca, doutor em Microbiologia e cientista líder do programa “Medidas de controle para combate de doenças em suínos em animais estrangeiros”, do Departamento de Agricultura dos Estados Unidos. Os resultados obtidos até o momento foram apresentados no Pré-Congresso do IPVS2022 pelo especialista José Manuel Sánchez-Vizcaíno.

No estudo, Borca descreve que até o momento, apenas 15 genes da PSA foram identificados como determinantes de virulência, dos quais nove demonstraram produzir atenuação na PSA-G, o que demonstra que podem ser usados ​​para desenvolver uma cepa atenuada capaz de induzir proteção contra o desafio com o isolado de campo responsável pelo atual cenário da doença que afeta a Eurásia.

Borca menciona na pesquisa que a mutação de genes de vírus mesmo altamente conservados mostrou ter diferentes consequências em termos de virulência do vírus, dependendo da cepa considerada. “Esses fatores tornam a identificação e a caracterização de novos determinantes genéticos de virulência uma questão essencial para a produção racional da próxima geração de candidatos a vacinas vivas atenuadas para proteger suínos contra a atual cepa pandêmica de PSA”, evidenciou.

Experimentos

Na primeira tentativa de desenvolver uma cepa atenuada viva baseada no vírus isolado PSA-G foi a deleção do gene 9GL, o qual produziu atenuação do fenótipo virulento PSA-G quando usado em doses relativamente baixas (menos de 103 HAD50), mas mostrou virulência residual em dose mais alta.

Conforme dados expostos aos congressistas do IPVS2022, José Manuel explicou que independentemente do resíduo de virulência, quando usado em dose subletal (a 103 HAD50 ou menos), o PSA-G-9GL induziu uma proteção eficaz contra o desafio com a PSA-G, tanto aos 21 quanto aos 28 dias. “O PSA-G-9GL foi um dos primeiros vírus atenuados recombinantes relatados para induzir proteção contra o vírus isolado da Geórgia epidemiologicamente importante”, pontuou.

Entretanto, José Manuel expôs, em sua apresentação, que para aumentar o perfil de segurança da PSA-G-9GL o estudo conduzido por Borca promoveu a combinação da deleção do gene 9GL com a deleção adicional do gene UK, dando origem ao PSA-G-9GL/UK, um vírus que abriga deleções de ambos os genes, e que apresentou um fenótipo drasticamente mais atenuado do que o parental PSA-G-9GL. Com isso, os suínos inoculados com até 106 HAD50 de PSA-G-9GL permaneceram clinicamente normais e foram efetivamente protegidos contra o desafio com 103 HAD50 do vírus isolado da Geórgia.

A pesquisa também evidenciou que a atenuação da PSA virulento foi alcançada pela exclusão de seis genes pertencentes aos grupos MGF360 e MGF505 do genoma do PSA-G altamente virulento. “Os suínos inoculados com até 104 HAD50 do vírus recombinante resultante PSA-G-MGF permaneceram saudáveis, sem sinais da doença e, quando desafiados com a cepa parental virulenta PSA-G não foram observados sinais da doença, embora uma proporção desses animais abrigava o vírus de desafio”, descreve Borca.

Outro vírus recombinante de deleção de gene único com capacidade de vacina foi desenvolvido pela mutação do gene I177L do genoma da PSA-G virulento. O vírus recombinante sem o gene PSA-G-I177L apresenta uma drástica diminuição da virulência quando inoculado em suínos. “Os animais que receberam até 106 HAD50 permaneceram clinicamente normais e foram completamente protegidos contra o desafio com vírus PSA-G aos 28 dias, inclusive aqueles que receberam apenas 102 HAD50 de PSA-G-I177L”, apontou o estudo.

Por sua vez, os animais vacinados com doses de 104 HAD50 ou superiores de PSA-G-I177L desenvolveram imunidade estéril contra o vírus de desafio. No entanto, descreve a pesquisa, que a eficácia do PSA-G-I177L também foi testada usando como vírus de desafio um isolado de campo altamente virulento do Vietnã, denominado TTKN/ASFV/DN/2019. O experimento induziu proteção contra o desafio TTKN/ASFV/DN/2019 com eficácia semelhante à cepa encontrada na Geórgia em ensaios clínicos conduzidos em paralelo usando suínos com antecedentes genéticos europeus (Yorkshire/Landrace crossbread) e vietnamita (Mong cai).

Administrada por via oronasal para explorar seu potencial uso como vacina oral, os animais inoculados oronasalmente com a PSA-G-I177L e desafiados 28 dias depois com o vírus isolado virulento de PSA-G foram protegidos, não apresentando sinais clínicos associados à PSA. “Uma modificação do PSA-G-I177L foi obtida adaptando o vírus para crescer em uma linhagem de células suínas estabelecida, como forma de facilitar sua produção em escala industrial”, relata José Manuel.

Em outro desafio realizado com o vírus adaptado PSA-G-I177L/LVR em suínos domésticos demonstrou a manutenção do mesmo nível de atenuação, características imunogênicas e eficácia protetora do PSA-G-I177L. Outro experimento, desta vez com a mutação do gene PSA A137R, também demonstrou atenuar o vírus PSA-G.

Por fim, o estudo mostrou que todos os animais inoculados com PSA-G-A137R foram protegidos quando desafiados com a cepa parental virulenta PSA-G, sem mostrar evidência de replicação do vírus de desafio.

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